医疗检测

皮肤致敏测试是医疗器械材料生物相容性评价的核心项目，直接关系产品临床安全，而三方检测作为独立公正的评价环节，对样品准备的规范性要求极高——样品的代表性、处理方式、保存条件等细节，都会直接影响测试结果的准确性。本文结合ISO 10993-10、GB/T 16886等标准，系统拆解医疗器械材料皮肤致敏测试的样品准备要点。

样品的代表性要求

样品需能代表批量生产的产品质量，需从稳定生产批次中随机抽取，覆盖不同批次、加工工序及关键接触部位（如导管内外层、敷料粘性层）。抽样数量需满足重复性要求，通常至少3个独立样品，例如医用胶带需从3个批次各抽10片，每片切5个样品覆盖各层。

组件式医疗器械（如人工关节）需分别准备每个组件（股骨头、髋臼杯），避免组件间材料差异导致偏差。样品需与上市产品的生产工艺、原材料完全一致，严禁使用研发原型——原型产品的工艺未稳定，无法反映实际致敏风险。

若样品为多部位材料（如输液管的软管与接头），需分别取样测试，确保每个接触皮肤的部位都被覆盖。抽样需遵循GB/T 16886.1的原则，避免“选择性抽样”，如只取外观完好的样品，需包含正常生产中的偏差样（如边缘轻微毛刺的塑料件）。

样品形态的标准化处理

固体块状材料（如医用塑料板）需切至统一尺寸（通常10mm×10mm×2mm），边缘打磨光滑，避免尖锐边角影响提取或划伤动物皮肤。粉末材料（如羟基磷灰石粉）需过100目筛，确保粒度均匀——颗粒过大易导致提取浓度不均，过小则增加吸入风险。

液体样品（如眼科冲洗液）需经0.45μm滤膜过滤，去除悬浮颗粒；半固体（如hydrogel敷料）需搅拌均质，避免分层。弹性材料（如橡胶手套）需拉伸至1.5倍原长固定，模拟临床使用时的张力状态，确保成分充分释放。

多孔材料（如海绵止血材料）需挤压除空气，提取比例调整为1:20（w/v）以补偿孔隙体积，确保提取液充分渗透。形态处理后需检查均匀性，如凝胶无分层、粉末无结块，避免因形态不均导致提取效率差异。

提取液的制备规范

提取液需选合适介质：水溶性材料用生理盐水，脂溶性用大豆油，难溶性用DMSO，介质需匹配临床场景（如皮肤敷料用生理盐水，黏膜栓剂用大豆油）。提取比例通常为1:10（w/v），吸水性材料（如棉纱布）需调至1:20。

提取条件需严格控制：37℃±1℃、振荡120rPm±10rPm、24小时±1小时——温度过高会降解热敏成分，振荡过慢则提取不充分。提取后用0.22μm滤膜过滤，去除微生物与颗粒，提取液需当天使用，或2-8℃冷藏不超过24小时。

挥发性材料（如含乙醇的消毒棉）需用密封容器提取，留10%顶空防压力过高；易氧化材料（如维生素E敷料）需通氮气保护，避免氧化产物干扰结果。提取液若浑浊、沉淀，需重新制备，不得使用变质液。

阴性与阳性对照样品的同步准备

阴性对照用无致敏性材料（如高密度聚乙烯），处理方式与待测样一致（同尺寸、同提取条件），用于验证试验体系无背景干扰。阳性对照用已知致敏物（如2,4-二硝基氯苯，浓度0.1% w/v），确保浓度准确——过高会致死，过低无阳性反应。

对照样品数量需与待测样一致（如3个平行样），处理流程完全同步。试验后需确认：阴性对照无致敏反应，阳性对照致敏率≥80%，否则结果无效需重测。对照样品需单独标识，避免与待测样混淆。

样品的标识与追溯体系

样品需标注完整信息：名称、注册证号、批次、规格、抽取日期/人、制备日期/人、试验项目。标识用耐水耐酒精标签，粘贴于容器上，如提取液需标注“XX导管提取液，批次20230501，介质生理盐水，比例1:10，制备人张三”。

三方检测机构需核对标识与《样品信息表》一致，缺失信息需及时补充。同时建立追溯台账，记录样品接收、处理、保存、使用及销毁全流程，保留记录至少5年，确保试验可追溯。

样品保存的环境要求

固体样品常温干燥保存（15-25℃，湿度<60%），避阳光直射——紫外线会降解PVC等材料。液体样品（含提取液）2-8℃冷藏，避免冻结——冻结会破坏成分结构。生物源性材料（如胶原蛋白）需-20℃冷冻，避免反复冻融（会断裂蛋白质分子）。

样品保存时间严格控制：固体样制备后14天内使用，提取液24小时内使用。长途运输需用保温箱——固体用干燥箱，液体用冷藏箱，运输不超过48小时，避免温度波动影响样品稳定性。

特殊材料的额外处理

可吸收材料（如聚乳酸缝线）需缩短提取时间至12小时，提取2次合并液，避免降解产物过多。同时检测提取液中乳酸浓度（<20mmol/L），防止高浓度乳酸干扰结果。

金属材料（如不锈钢植入物）需预处理：丙酮超声10分钟除油脂，生理盐水泡24小时查腐蚀，提取液需测重金属离子（铅、镉等），符合GB/T 16886.12限量。含药物的器械（如庆大霉素骨科钉）需分离药物与材料，避免药物干扰材料致敏性评价。

纳米材料（如纳米银敷料）需测粒径（1-100nm）与分散性，提取液测纳米颗粒浓度（如ICP-MS测银含量），确保与临床释放量一致——纳米颗粒易团聚，需均质后再提取。

避免干扰因素的注意事项

处理样品需用无粉手套或聚乙烯手套，避丁腈手套（增塑剂会转移到样品）；器具用玻璃或聚乙烯，避不锈钢（金属离子会反应生成致敏物），器具需高温灭菌或乙醇消毒。

样品表面污染物需清除：固体样用无水乙醇超声10分钟，去离子水冲3次；液体样用0.5%活性炭吸附30分钟过滤。提取液禁加叠氮化钠（抑制免疫），若需防腐剂选山梨酸钾（<0.1%）。

试验中避免样品接触有机溶剂（如乙醇）、阳光，防止成分降解或变性。若样品需切割，用玻璃刀或陶瓷刀，避金属刀（金属屑会污染样品）。