食品检测

在植物源性样品（如谷物、果蔬、豆类）的膳食纤维检测中，油脂会干扰酶解反应、吸附检测试剂，直接影响结果准确性，因此脱脂处理是关键前处理环节。本文聚焦脱脂的核心步骤，从样品预处理、试剂选择到操作细节展开，为实验室提供可落地的实操指导。

脱脂前的样品预处理：粉碎与干燥

样品预处理的核心是提升脱脂效率。首先需将样品粉碎至均匀粉末，粒度需过40目标准筛——细粒度可增加与试剂的接触面积，避免颗粒过大导致内部油脂无法溶出。粉碎时需控制产热（如间歇操作），防止油脂氧化聚合或膳食纤维变性。

新鲜样品（如蔬菜、水果）含大量水分，会降低试剂对油脂的溶解度，需干燥至恒重。优先选择50-60℃真空干燥：真空环境降低水的沸点，缩短干燥时间；低温避免热敏性膳食纤维（如β-葡聚糖）破坏，同时防止油脂酸败。常压干燥需延长至12-24小时，定期翻动确保均匀。

脱脂试剂的选择：类型、纯度与用量

脱脂试剂需兼顾溶解性、挥发性与安全性，最常用石油醚（沸点30-60℃）：其沸点适中、挥发性强，提取后可完全挥除；对植物油脂（甘油三酯、磷脂）溶解度高，且不易残留。乙醚虽溶解能力强，但易燃易挥发，安全性差，较少使用。

试剂需选分析纯，避免杂质（如烃类）干扰后续酶解反应（如总膳食纤维的酶-重量法）。用量需确保样品完全浸没，通常按“样品质量:试剂体积=1:10（g/mL）”配比——如1g干燥样品加10mL石油醚，不足则无法充分接触，导致脱脂不完全。

脱脂方式的优化：索氏提取与替代方法

索氏提取是经典高效法，通过连续回流实现：将样品装入滤纸筒（压实防漏），放入提取器；圆底烧瓶加石油醚（容积1/3-1/2），加热回流4-6小时，直至提取液由浊变清。需控制冷凝水流速，避免试剂挥发过快。

批量处理可选振荡提取：样品加试剂入锥形瓶，用200-300rpm振荡器振荡1-2小时，结束后离心（3000rpm，5分钟）分离。超声提取更高效：用200-300W、40kHz超声仪，25-30℃下处理30-60分钟，利用空化效应加速油脂溶出，但需监测温度防试剂挥发。

脱脂程度的判断：定量与定性验证

脱脂完全性需通过数据验证：重量法是常用手段——称脱脂前（m1）后（m2）质量，计算脱脂率（(m1-m2)/m1×100%），连续两次提取差值＜0.1%即达标。或取最后一次提取液5mL，挥干后称重，残留＜0.001g（占样品0.1%以下）则合格。

定性可用红外光谱法：检测样品中油脂特征峰（C-H伸缩振动2920cm⁻¹、C=O伸缩振动1740cm⁻¹），若吸光度低于空白对照10%，说明油脂残留极低。

脱脂后的样品处理：挥干与保存

脱脂后需彻底去除残留试剂，避免影响后续检测。优先通风橱自然挥干：样品平铺培养皿（厚度＜5mm），室温放置2-4小时，定期翻动。加速可选40-50℃真空干燥（0.08-0.1MPa）1-2小时，确保试剂完全挥发。

处理后样品需立即入干燥器（加硅胶干燥剂）保存，防止吸潮——膳食纤维吸水性强，吸潮会导致称量误差。短期（＜7天）可室温干燥保存，长期需密封-20℃冷冻，避免油脂析出或膳食纤维结构变化。