医疗检测

急性全身毒性测试是医疗器械生物安全性评价的核心项目之一，用于评估器械及其浸提液对机体的急性毒性反应。第三方测试机构作为独立评价主体，其留样管理直接关系到测试结果的准确性、可追溯性及法规符合性。科学、规范的留样管理不仅能支撑测试结果的重现性验证，还能在客户质疑、法规核查时提供关键证据。本文结合《医疗器械生物学评价 第11部分：全身毒性试验》（GB/T 16886.11）等法规要求，系统梳理第三方机构急性全身毒性测试的留样管理要点。

留样的定义与核心目的

留样是指第三方测试机构在急性全身毒性测试过程中，对与测试相关的样品、试剂及衍生物品进行留存的行为。其核心目的在于实现“可追溯性”——当测试结果出现异常、客户提出复检需求或法规机构开展核查时，留样可作为原始证据还原测试过程。

具体而言，留样的作用包括三方面：一是支持重复测试，若初始结果存疑，可通过留样进行复试以确认结论；二是应对投诉或争议，当客户对测试结果提出质疑时，留样可用于第三方复核；三是满足法规要求，如GB/T 16886.11明确规定“试验过程中产生的关键样品应留存”，确保测试活动符合合规性要求。

需注意的是，留样并非“简单保存”，而是要保证留样的状态与测试时一致——若留样在保存期间发生降解、污染或性状改变，其追溯价值将完全丧失。因此，留样管理的本质是“维持样品的原始特性”。

留样的范围与筛选原则

第三方机构需明确留样的覆盖范围，避免遗漏关键样品。通常，急性全身毒性测试的留样范围包括四类：一是测试用医疗器械样品（如植入性器械的原材料、一次性器械的成品）；二是浸提液（按GB/T 16886.12制备的器械浸提液，是毒性测试的直接对象）；三是对照样品（如空白浸提介质、阴性对照品）；四是动物衍生样品（如测试动物的血清、脏器组织，用于后续毒性机制分析）。

筛选留样时需遵循“关键节点”原则：即对测试结果有直接影响的样品必须留存。例如，浸提液是急性毒性测试的“核心对象”，若未留存，将无法复现测试过程；对照样品用于验证测试系统的有效性，若未留存，无法证明测试条件的合理性。

此外，需根据器械类型调整留样范围。例如，对于可吸收医疗器械，其原样品的降解特性可能影响留样稳定性，需额外留存降解中间产物；对于无菌医疗器械，需留存灭菌后的样品，而非灭菌前的原材料，确保留样与测试用样品一致。

留样的数量与规格要求

留样数量需满足“至少一次重复测试”的需求——即留样量应足够完成一次完整的急性全身毒性测试，包括浸提液制备、动物注射及指标检测。例如，若某医疗器械的浸提液制备需要10g样品，留样应至少留存20g（原样品），以保证能重新制备浸提液。

对于液体样品（如浸提液、血清），留样量需考虑检测方法的需求。例如，若采用小鼠腹腔注射法（GB/T 16886.11-2011中方法A），每只小鼠需注射0.5ml浸提液，每组10只小鼠则需5ml，因此浸提液留样应至少留存10ml（足够一次重复测试）。

规格方面，留样需保持与测试用样品一致的形态。例如，若测试用医疗器械是片状（1cm×1cm），留样也应切成相同规格，避免因形态差异导致浸提效率不同；若浸提液是经滤膜过滤后的澄清液体，留样需保持过滤后的状态，不得再次过滤或稀释。

需注意，留样量并非越多越好——过量留样会增加储存成本，且可能因储存空间不足导致样品损坏。第三方机构应根据测试方法的最小需求量，结合自身复现能力确定合理的留样量。

留样的包装与标识规范

包装是维持留样稳定性的第一关。不同样品需采用不同的包装材料：原医疗器械样品若为固体，应使用防潮、防氧化的密封袋（如铝箔袋）；浸提液若为水性液体，应使用无菌聚丙烯瓶（避免吸附）；动物血清需使用cryovial冻存管（耐低温）。

包装过程中需避免样品污染：例如，无菌样品的包装需在超净工作台中进行，使用无菌手套和工具；易挥发样品需采用密封性能良好的容器（如带垫片的螺口瓶），防止成分流失。

标识是留样可追溯性的关键。每份留样需标注唯一标识符（如“L-20240315-001”，包含留样日期和顺序号），并附带以下信息：样品名称（如“一次性输液器浸提液”）、来源（如“客户名称：XX医疗科技有限公司”）、制备日期（如“2024-03-15”）、有效期（如“2024-09-15”）、储存条件（如“4℃冷藏”）、留样人（如“张三”）。

标识需清晰、不易脱落：建议采用激光打标或防水标签（如聚酯标签），避免因储存时间过长或环境潮湿导致标识模糊。

留样的储存条件管理

储存条件直接影响留样的稳定性。第三方机构需根据样品的物理化学特性制定储存方案：

1、原医疗器械样品：若为非降解材料（如不锈钢、聚乙烯），可在常温（15-25℃）、干燥（相对湿度＜60%）、避光条件下储存；若为可降解材料（如聚乳酸），需冷藏（4℃）或冷冻（-20℃），延缓降解速度。

2、浸提液：水性浸提液（如生理盐水浸提液）需冷藏（4℃），避免微生物滋生；油性浸提液（如橄榄油浸提液）需避光、常温储存，防止氧化酸败。

3、动物血清：需冷冻（-80℃）或液氮（-196℃）保存，避免蛋白变性。

储存区域需分区管理：将不同类型的留样分开存放（如原样品区、浸提液区、动物样品区），避免交叉污染；设置温湿度监控系统（如自动记录仪），每天记录储存环境的温湿度，若超出范围（如冷藏区温度＞8℃），需及时采取纠正措施（如转移样品至备用冰箱）。

此外，储存设备需定期维护：例如，冷藏冰箱每月清洁一次，检查密封条的密封性；液氮罐每周补充一次液氮，确保液面高度符合要求。

留样的取用与记录流程

留样的取用需遵循“审批-记录-归还”的流程，确保每一次取用都可追溯：

1、审批：如需取用留样（如客户要求复检），申请人需填写《留样取用申请表》，说明取用目的（如“客户质疑测试结果，需复检浸提液的LD50值”）、取用数量（如“5ml浸提液”），经实验室主管批准后方可取用。

2、记录：取用过程需记录在《留样取用记录》中，内容包括：留样唯一标识符、取用时间（如“2024-04-01 10:00”）、取用人（如“李四”）、取用用途、取用数量、剩余数量（如“原10ml，取用5ml，剩余5ml”）。

3、归还：若取用后剩余样品，需及时归还至储存区域，并更新储存记录；若样品已全部取用，需在记录中注明“已用完”。

需注意，取用冷冻样品时需避免反复冻融：例如，动物血清需先从液氮罐中取出，在4℃冰箱中缓慢解冻，取用所需量后，剩余部分需重新冷冻（-80℃），避免蛋白结构破坏。

留样的销毁管理

留样并非永久保存，到期后需按流程销毁：

1、确定销毁期限：根据法规和客户要求，留样期限通常为测试报告批准后6个月至1年（如GB/T 16886.11要求保存至报告批准后至少6个月）；若客户要求延长（如“保存2年”），需按客户要求执行。

2、销毁前核查：销毁前需确认留样已过有效期，且无未处理的客户质疑或法规核查需求。例如，若某留样的有效期至2024-09-15，需在2024-09-16后核查是否有未解决的问题，若无则启动销毁。

3、销毁方式：根据样品类型选择合适的方式：原医疗器械样品若为塑料，可采用焚烧（符合环保要求）；浸提液若为水性，可经中和处理后排入污水系统；动物样品需按生物安全要求处理（如高压灭菌后焚烧）。

4、销毁记录：销毁过程需记录在《留样销毁记录》中，内容包括：留样唯一标识符、销毁时间（如“2024-09-16”）、销毁方式（如“焚烧”）、执行人（如“王五”）、见证人（如“赵六”）。