医疗检测

三方检测的皮肤致敏测试是化妆品、护肤品安全性评估的核心环节，阳性结果直接关系产品能否合规上市。明确阳性结果的判定依据及处理流程，对企业降低风险、保障消费者安全至关重要。本文聚焦三方检测中皮肤致敏阳性结果的核心判定标准与规范处理步骤，为行业提供实操指引。

皮肤致敏测试阳性结果的核心判定依据

三方检测中，皮肤致敏阳性结果主要基于两种国际通用方法判定，确保结果的科学性与一致性。

第一种是局部淋巴结试验（LLNA），通过检测动物淋巴结细胞的增殖反应判定。当增殖指数（SI）≥3时，即处理组细胞增殖水平是对照组的3倍及以上，说明免疫系统对测试物产生致敏反应，判定为阳性。

第二种是豚鼠最大化试验（GMPT），分为诱导和激发两个阶段。激发后，若动物皮肤红斑/水肿评分≥2分（按Draize法，2分代表明显红斑或中度水肿），且出现致敏反应的动物比例≥15%，则判定为阳性。

体外测试如人源细胞系试验（h-CLAT），则通过细胞表面标志物CD86和CD54的表达升高判定。当CD86≥1.5倍对照组、CD54≥1.2倍对照组时，即为阳性。所有方法均需符合OECD 429、406等指南要求。

阳性结果的实验室内部复核要点

三方机构出具阳性结果前，需完成严格的内部复核，避免操作错误导致的假阳性。

首先是操作记录追溯，核查动物饲养条件（温度22±2℃、湿度50±10%）、试剂批号（如3H-胸腺嘧啶脱氧核苷的有效期）、给药剂量（是否准确按照配方浓度计算），确保无操作偏差。

其次是人员资质验证，确认检测人员具备过敏原测试培训背景，参与过OECD试验的实操训练，近12个月无检测错误记录，保证操作规范性。

第三是仪器校准检查，如LLNA使用的液闪计数器需在检定有效期内，计数效率≥80%、本底计数≤100cPm；GMPT使用的皮肤评分卡尺需校准至误差≤0.1mm，确保数据准确。

最后是统计学复核，确认样本量（每组≥5只动物）、数据正态性及显著性检验（P<0.05）符合要求，避免统计错误。

三方机构与委托方的沟通内容

机构向委托方传达阳性结果时，需做到信息透明、专业准确，帮助委托方理解结果。

一是明确结果依据，说明使用的测试方法及阳性判定标准（如“本结果基于LLNA，SI=5.2≥3”），避免模糊表述。

二是提供原始资料，包括动物皮肤反应照片、SI计算表、组织病理学切片等，直观展示结果的支撑数据。

三是说明不确定性，提示动物个体差异（如某只动物反应异常）、样品代表性（如测试样品是否为批量生产样品）等可能影响结果的因素。

四是要求反馈时限，提醒委托方10个工作日内反馈初步调查结果，推动后续处理流程。

委托方的初步原因排查方向

委托方收到阳性结果后，需快速排查可能导致阳性的原因，为后续整改提供依据。

首先是原料溯源，检查配方中是否使用已知过敏原（如香精中的柠檬醛、防腐剂中的甲基异噻唑啉酮），确认其含量是否超过安全阈值（如香精含量≤0.1%）。

其次是配方变化，确认近期是否调整原料比例（如增加香精用量从0.1%到0.5%）或更换供应商，导致过敏原暴露增加。

第三是工艺验证，核查生产工艺参数（如乳化温度、均质时间），是否因工艺变化导致过敏原释放增加（如温度过高使乳化不完全，过敏原暴露在产品表面）。

第四是样品核查，确认测试样品是否与批量生产的产品一致，若样品为实验室小试样品，需重新提供批量样品检测。

第三方复测试验的规范要求

若委托方对阳性结果有异议，需通过第三方复测试验验证，确保结果可靠。

复测试验的机构需具备相同的测试能力，即获得CNAS认可的皮肤致敏测试项目（如OECD 429、406），且参加过能力验证并取得满意结果。

复测试验需保持条件一致性，使用与原试验相同的动物品系（如SPF级Hartley豚鼠）、试剂批号、给药剂量，避免条件差异导致结果偏差。

复测试验结果需对比分析：若复结果为阳性，说明原结果可靠；若为阴性，需排查差异原因（如原试验中某只动物的异常增殖、操作偏差）。

复测试验报告需包含详细的差异分析，帮助委托方理解结果差异的本质，避免盲目质疑。

阳性结果的整改与再次验证

根据阳性结果的风险等级，委托方需采取针对性整改措施，降低产品风险。

风险分级需考虑三方面：致敏强度（LLNA的SI≥10为强致敏，3≤SI<10为中等致敏）、暴露途径（经皮暴露风险低于吸入暴露）、目标人群（婴儿产品风险高于成人产品）。

整改措施包括：原料替换（用无香配方替代香精，用甲基氯异噻唑啉酮替代甲基异噻唑啉酮）、工艺优化（用微囊化技术包裹过敏原，减少皮肤接触）、标签完善（增加“可能引起过敏”的警示语，列出过敏原成分）。

整改后需再次进行皮肤致敏测试，确认结果为阴性（LLNA的SI<3，GMPT的红斑/水肿评分<2分且致敏比例<15%）。

此外，需通过人体斑贴试验验证临床安全性，选取50-100名志愿者（包括敏感肌人群），涂敷产品后观察48-72小时，若反应率≤1%，说明产品临床风险较低，可上市销售。